摘要: 目的 　观察不同月龄C57BL/6 小鼠大脑皮质不同功能区的微血管构筑,并进行定量分析。 方法 采用改良碱性磷酸酶染色法染色C57BL/6 小鼠大脑皮质运动皮质区(初级运动皮层、次级运动皮层)、感觉皮质区(初级体感皮层、次级体感皮层)、视觉皮质区(初级视觉皮层、次级视觉皮层)、听觉皮质区(初级听觉皮层、次级听觉皮层)、嗅觉皮质区(外嗅皮层、内嗅皮层)的微血管形态,OLMPUS BX51 显微镜结合Image-Pro Plus 5. 1 进行图像捕获,采用Image-Pro Plus 5. 1 软件进行微血管长度密度(mlcrovascular length density,Lv)、微血管表面积密度(microvascular surface area density,Sv)、微血管体积密度(microvascular volume density,Vv)的定量分析。 结果　碱性磷酸酶在成年组和老年组的大脑皮质微血管内表达丰富,在幼年组略有表达,而在乳鼠组无表达;软脑膜血管进入皮质的方式分T 字形、Y 字形、大弧形和小弧形四种;相同年龄不同部位的Lv、Sv 和Vv 显示运动皮质区、感觉皮质区、视觉皮质区、听觉皮质区、嗅觉皮质区呈现下降趋势,且运动皮质区和感觉皮质区与嗅觉皮质区比较Lv、Sv、Vv微血管密度有统计学意义(P<0. 05)。老年组的各功能区血管密度均较成年组降低,但无统计学意义(P>0. 05)。 结论 　C57BL/6 小鼠大脑皮质不同功能区微血管内碱性磷酸酶的表达随年龄增长而增多,成年时达到峰值,其脑内微血管构筑为脑血管疾病及模型制备提供形态学参数。

摘要: 目的 　探讨免疫球蛋白γ-1 重链恒定区(immunoglobulin γ-1 heavy chain constant region,IGHG1)在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)THP-1 细胞中的表达以及调控转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β) / Smad 通路对细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。 方法 　以9 例AML 患儿的骨髓标本、8 例骨折患儿的骨髓标本、人骨髓基质细胞HS-5 及人AML 细胞THP-1、HL60 为研究对象,Western blot 检测IGHG1 蛋白表达;将THP-1 细胞分组为空白(细胞未经任何处理)、si-NC、si-IGHG1-1、si-IGHG1-2、si-IGHG1-3、TGF-β、si-IGHG1-1+TGF-β、si-IGHG1-1+TGF-β+LY364947(TGF-β/ Smad 通路抑制剂)组。CCK-8 法检测细胞增殖;流式细胞术和Transwell 实验分别测定细胞凋亡和侵袭;Western blot 评估细胞中IGHG1、TGF-β、p-Smad2、p-Smad3 蛋白表达。 结果　与骨折患儿骨髓比较,AML 患儿骨髓中IGHG1 蛋白((0. 24±0. 03)vs(0. 87±0. 12))表达水平显著升高(P<0. 05);与HS-5 细胞比较,THP-1、HL60 细胞中IGHG1 蛋白((0. 89±0. 14)(0. 75±0. 08)vs(0. 21±0. 02))表达升高(P<0. 05);与空白组比较,si-IGHG1-1 组THP-1 细胞OD₄₅₀ 值(24、48、72 h)、侵袭细胞数目、TGF-β、p-Smad2、p-Smad3 蛋白表达均显著降低,细胞凋亡率升高,TGF-β 组对应指标呈相反变化(P<0. 05);TGF-β 逆转了沉默IGHG1 对THP-1 细胞增殖、凋亡和侵袭的影响;与si-IGHG1-1+TGF-β 组比较,si-IGHG1-1+TGF-β+LY364947 组TGF-β、p-Smad2、p-Smad3 蛋白、OD₄₅₀值(24、48、72 h)及侵袭细胞数目显著降低,细胞凋亡率升高(P<0. 05)。 结论 　IGHG1 在AML 细胞中高表达,沉默IGHG1 可抑制AML 细胞增殖及侵袭,并促进AML 细胞凋亡,该机制可能与抑制TGF-β/ Smad 通路有关。

摘要: 目的 　探讨京尼平苷对糖尿病性皮肤溃疡大鼠的保护作用及其机制。 方法 　将大鼠分为正常组、模型组、京尼平苷治疗组(Gen(L):200 mg/ kg;Gen(H):500 mg/ kg)。在糖尿病大鼠皮肤溃疡造模后,各组大鼠均灌胃生理盐水或京尼平苷(n=6)。每天给药1 次,每天记录各组伤口愈合情况及炎症情况。在糖尿病性皮肤溃疡治疗7 d 后,分别通过测量皮肤溃疡创口面积、组化切片与TUNEL 染色及Western blot 蛋白免疫印迹法量化分析创面愈合、细胞凋亡及其相关调节蛋白表达的变化情况。 结果　与模型组相比,京尼平苷(200 mg/ kg 和500 mg/ kg)口服能显著促进糖尿病大鼠创面愈合,增加损伤处的收缩。在糖尿病大鼠皮肤创面凋亡研究中,京尼平苷治疗大鼠TUNEL 染色阳性细胞明显减少(P<0. 05)。京尼平苷能显著抑制皮肤炎症,促进创面修复可能与促进PI3K 和Akt 蛋白磷酸化有关。 结论 　京尼平苷通过抑制炎症反应和细胞凋亡促进糖尿病大鼠皮肤创面修复。

摘要: 目的 　探讨人羊膜上皮细胞(hAECs)移植对大鼠子宫瘢痕模型子宫内膜的改善及对基质金属蛋白酶8(MMP-8)、血管内皮生长因子(VEGF)的影响。 方法 　建立大鼠子宫瘢痕模型,并随机分为模型组及移植组,每组各18 只,另取18 只大鼠作为假手术组。移植组大鼠于子宫瘢痕处注射hAECs,模型组及假手术组仅给予等量PBS。4 周后,各组取8 只大鼠子宫组织,HE 染色和Masson 染色分别观察组织形态学变化和纤维化情况,测量子宫内膜厚度和腺体数量;细胞角蛋白和整合素β3 免疫组化染色分别评估子宫内膜生长和容受性;RT-qPCR 技术检测子宫内膜组织中MMP-8、VEGFA mRNA 表达水平;Western blot 法检测组织中MMP-8、VEGFA 蛋白表达水平;8 周后,取各组剩余10 只大鼠进行妊娠能力测定。 结果　模型组及移植组大鼠子宫内膜厚度、腺体数、角蛋白和整合素β3 IOD 值、MMP-8、VEGFA mRNA 和蛋白相对表达水平、妊娠率和子宫胚胎数低于假手术组(P<0. 05);移植组大鼠子宫内膜厚度、腺体数、角蛋白和整合素β3 IOD 值、MMP-8、VEGFA mRNA 和蛋白相对表达水平、妊娠率和子宫胚胎数高于模型组(P<0. 05),另外,hAECs 移植可改善子宫瘢痕大鼠子宫内膜组织病理形态,减轻子宫内膜纤维化程度。 结论 　hAECs 移植可改善子宫内膜损伤,减少瘢痕形成,提高子宫内膜容受性,并增强模型大鼠的妊娠功能,其作用机制可能与促进MMP-8 和VEGFA 表达有关。

摘要: 目的 探索恒古骨伤愈合剂对db/ db 小鼠血糖和肠道微生物的影响。 方法 　将野生型小鼠作为对照组,db/ db 小鼠随机分为模型组和恒古骨伤愈合剂治疗组;灌胃给药12 周后,检测空腹血糖、血清糖化血红蛋白和胰岛素含量,使用16S rDNA 技术分析小鼠肠内容物菌群变化及预测菌群功能。 结果　与模型组比较,恒古骨伤愈合剂降低db/ db 小鼠空腹血糖(P<0. 01)、血清糖化血红蛋白(P<0. 01)、胰岛素抵抗指数(P<0. 01),升高胰岛素含量(P<0. 01);恒古骨伤愈合剂增加db/ db 小鼠盲结肠有益菌丰度,降低害菌丰度,其中马文氏菌属的丰度显著升高(P<0. 01);恒古骨伤愈合剂抑制了db/ db 小鼠菌群D-精氨酸和D-鸟氨酸代谢、鞘脂代谢、半乳糖代谢的降低及赖氨酸降解、硫中继系统、丙酸代谢的升高(P<0. 05)。 结论 　恒古骨伤愈合剂具有降血糖功效和调节db/ db 小鼠肠道微生态平衡的作用。

摘要: 目的 　探讨miRNAs 在大鼠酒精性肝损伤病变过程中的作用及其机制。 方法 　将30 只雄性SD 大鼠随机分成模型组和对照组,模型组灌胃56%白酒,对照组灌胃蒸馏水,连续8 周;解剖取肝组织,采用大鼠miRNA芯片对肝中miRNAs 进行检测,对其表达量进行分析,对差异miRNA 进行靶基因预测,并采用Gene Ontology(GO)和KEGG Pathway 富集分析了解差异miRNA 靶基因的功能,使用Cytoscape 构建差异miRNA-mRNA-Pathway 调控网络进一步筛选调控关键miRNA 与关键通路,RT-qPCR 对挑选的miRNA 进行表达量验证分析。 结果　通过比较分析模型组和对照组芯片数据,共筛选出差异表达miRNA 12 个(P<0. 05,Fold change≥2),其中上调2 个,下调10个。差异miRNA 靶基因GO 分类注释显示,差异miRNA 与信号转导、代谢过程、抗氧化活性、细胞杀伤、酶调控活性、生物调控等生物功能密切相关。差异miRNA 靶基因KEGG Pathway 通路分析显示,AMPK 信号通路、PI3K-Akt信号通路、Hippo 信号通路、Wnt 信号通路、癌症、自噬、胰岛素抵抗、Ras 等信号通路可能在酒精性肝损伤病变过程中发挥着重要的调控作用。通过构建差异miRNA-mRNA-Pathway 调控网络筛选出的Hub miRNA 和通路有miR-145-5p、miR-107-3p、miR-297、Hippo 信号通路、癌症、PI3K-Akt 信号通路、AMPK 信号通路等。qRT-PCR 结果显示挑选验证miRNA 表达变化趋势和基因芯片结果一致。 结论 　本研究建立了大鼠酒精性肝损伤miRNA 表达谱,提示miR-145-5p、miR-107-3p 及miR-297 可能在肝酒精性病变过程中起着重要的作用。

摘要: 目的 　研究蒙药哈它各其-7 促进糖尿病大鼠溃疡创面愈合的治疗价值并初步探索其调控缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的分子机制。 方法 　成年雄性SD 大鼠随机分为对照组、糖尿病组、蒙药组和细胞因子组,每组各8 只。除对照组外、其余3 组采用腹腔注射链脲佐菌素的方法建立糖尿病模型,4 组均在背部制备溃疡创面,1周后蒙药组给予哈它各其-7 涂抹创面、细胞因子组给予重组牛碱性成纤维细胞生长因子喷洒创面,连续2 周。检测空腹血糖(FBG)、创面面积、创面病理改变、创面中晚期糖基化终末产物(AGEs)、AGE 受体(RAGE)、HIF-1α、血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平及白介素-1β(IL-1β)、干扰素-γ(IFN-γ)、丙二醛(MDA)、总抗氧化力(TAOC)水平。 结果　糖尿病组、蒙药组、细胞因子组的FBG 均高于对照组(P<0. 05),且三组间FBG 无显著性差异(P>0. 05);与对照组比较,糖尿病组的溃疡创面面积、镜下未修复组织范围增大,创面组织中AGEs、RAGE 的表达水平及IL-1β、IFN-γ、MDA 水平增加,T-AOC 水平及HIF-1α、VEGF 表达水平降低(P<0. 05);与糖尿病组比较,蒙药组、细胞因子组溃疡创面面积、镜下未修复组织范围缩小,创面组织中AGEs、RAGE 的表达水平及IL-1β、IFN-γ、MDA 水平降低,T-AOC 水平及HIF-1α、VEGF 表达水平增加(P<0. 05)且蒙药组的各项指标优于细胞因子组。 结论 蒙药哈它各其-7 促进糖尿病大鼠溃疡创面愈合,抑制AGEs 及RAGE 表达并激活HIF-1α 是可能的分子机制。

摘要: 目的 　探讨N-甲基-N-亚硝基脲(MNU)诱导SD 大鼠下焦湿热证尿血——膀胱癌(BC)模型的造模过程和成模率。 方法 　通过膀胱灌注MNU 的方法在造模前、造模中、造模后共计6个时间点进行分批次样品采集,并对膀胱组织进行HE 染色以了解膀胱原位癌的形成及发展过程。 结果　实验过程顺利,在操作过程中大鼠未出现明显尿路损伤现象。通过本造模手法模型组大鼠膀胱内有明显的上皮增生、破损及大面积肿瘤形成和尿血现象。 结论 　MNU可以成功诱导SD大鼠下焦湿热证尿血模型(膀胱癌),且成模明显,死亡率低,实验数据可为膀胱癌模型的建立、改良和应用提供一定的参考。

摘要: 目的 　探索定坤丹对子宫内膜异位症(EMs)大鼠PI3K/ AKT/ mTOR 信号通路的影响。 方法 　通过异位移植子宫内膜组织,构建EMs 大鼠模型,随机分为5 组:模型组(M 组)、定坤丹低(1. 13 g/ kg)剂量组(DKP-L组)、定坤丹中(2. 26 g/ kg)剂量组(DKP-M 组)、定坤丹高(4. 52 g/ kg)剂量组(DKP-H 组)、孕三烯酮(60 mg/ kg)组(GES 组),每组12 只,另取12 只正常SD 大鼠只开腹不异位移植子宫内膜组织,设为假手术组(Sham 组),以药物分组干预后处死大鼠,测定各组大鼠异位子宫内膜质量与体积,免疫组织化学染色检测大鼠异位子宫内膜微血管密度(CD31 阳性率)与VEGF、MMP-9 表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清VEGF、MMP-9、iNOS、TNF-α水平;蛋白免疫印迹实验检测大鼠异位子宫内膜PI3K/ AKT/ mTOR 通路相关蛋白的表达。 结果　与Sham 组相比, M 组大鼠异位子宫内膜微血管密度、VEGF 与MMP-9 表达、血清VEGF、MMP-9、iNOS 及TNF-α 水平、异位子宫内膜织p-PI3K/ PI3K、p-AKT/ AKT、p-mTOR/ mTOR 明显升高(P<0. 05);与M 组相比,DKP-L、DKP-M、DKP-H 组大鼠异位子宫内膜质量与体积、异位子宫内膜微血管密度、VEGF 与MMP-9 表达、血清VEGF、MMP-9、iNOS 及TNF-α 水平、异位子宫内膜p-PI3K/ PI3K、p-AKT/ AKT、p-mTOR/ mTOR 均降低,且DKP-L、DKP-M、DKP-H 组之间呈剂量依赖性(P<0. 05);DKP-H 组和GES 组相比,大鼠各指标无明显差异(P>0. 05)。 结论 　定坤丹可减轻炎症,抑制EMs大鼠异位内膜生长,可能是通过阻断PI3K/ AKT/ mTOR 信号途径传导实现的。

摘要: 目的 　探究纳米二氧化铈(CeO₂NPs)亚急性腹腔染毒对ICR 小鼠体重、主要脏器以及血清氧化还原指标的影响。 方法 　将雄性ICR 小鼠35 只随机分成5 组,每组7 只。设生理盐水对照组和不同浓度的CeO₂NPs(100、500、1000、5000 μg/ kg)试验组。小鼠腹腔隔日注射CeO₂NPs,28 d 后进行相关指标的检测。 结果　与对照组相比,CeO₂NPs 各剂量组小鼠体重增长差异不显著(P>0. 05);5000 μg/ kg 剂量组肝系数、附睾系数与精子存活率与对照组相比差异极显著(P<0. 01)。5000 μg/ kg 剂量组肝和脾内可见纳米氧化铈沉积,部分肝中可见肉芽肿。100 μg/ kg 剂量组血清SOD 和GSH-Px 活力升高,MDA 含量降低,体现出CeO₂NPs 的抗氧化作用,随着注射剂量的升高,CeO₂NPs 的氧化应激作用增强。 结论 　低剂量CeO₂NPs 对机体较安全,并表现出一定的抗氧化作用,随着剂量增加,CeO₂NPs 对机体的毒性也逐渐增强。

摘要: 目的 　探讨小鼠肝枯否细胞和肝星状细胞的提取及纯化方法,为小鼠原代肝非实质细胞分离提取方法学提供参考和建议。 方法 　以体内胶原酶灌注消化为基础,使用Percoll、OptiPrep 等不同的试剂和浓度梯度分别提取C57BL/6 小鼠的肝枯否细胞和肝星状细胞,并通过流式细胞仪、免疫荧光等方法验证纯化细胞的纯度。 结果　两层Percoll 法提取枯否细胞和两层OptiPrep 法提取肝星状细胞可行,纯度可达90%以上,细胞得率为1~2×10⁷ / 肝,细胞存活率在90%以上。细胞原代培养48 h 后,枯否细胞F4/80 阳性细胞、肝星状细胞α-SMA 阳性细胞均达90%以上。 结论 　小鼠肝中枯否细胞和肝星状细胞的分离提取方法完善可靠且具有成本效益和可重复性。

摘要:血管性痴呆(vascular dementia,VD)以脑血管病变为基础,即脑实质有出血性或缺血性病变,其中以缺血性较为多见。由于其导致的认知能力和记忆力的渐进性下降及日益上升的发病率已成为影响人们健康和生活质量的一个主要问题。因此,越来越多的学者开始着手研究VD 的发病机制和防治措施。建立合适的动物模型以用于研究治疗VD 各种方式的作用机制及其疗效评价,也成为本领域的研究重点。在常规建模方法,双侧血管阻断法(bilateral occlusion of the common carotid arteries,2VO)和四血管阻断法(four-vessel occlusion,4VO)的基础上,研究人员研发了其他改良方法,以期使VD 模型更稳定、更贴近VD 的临床表现。本文在列举现阶段研发的改良方法及其具体操作方法的基础上,介绍这些模型的优缺点和相关的细胞和分子机制。

摘要:神经退行性疾病(neurodegenerative diseases,NDs)是一类与中枢神经系统密切相关的精神疾病,以特定神经元群的形态异常和功能进展性丧失为主要特征,神经退行性疾病主要包括阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)、帕金森病(Parkinson’s disease,PD)、肌萎缩侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)、多发性硬化症(multiple sclerosis,MS)和亨廷顿病(Huntington’s disease,HD),目前还没有发现有效预防或治愈神经退行性疾病的策略。近年来,单细胞转录组技术(single-cell RNA-sequencing,scRNA-seq)被广泛应用于各种神经退行性疾病研究,并发现神经退行性疾病发病机制与脑中免疫细胞状态密切相关,主要涉及线粒体功能、葡萄糖代谢途径、炎症和突触传递等生物学过程,诱导性多功能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSC)疗法是治疗神经退行性疾病的潜在方案。本文对单细胞转录组测序技术在各种神经退行性疾病上的研究进行综述,以期对将来神经退行性疾病的预防和治疗提供参考。

摘要:建立科学有效的动物模型是完成疾病研究的关键步骤。饮食诱导是常见的建立非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)疾病动物模型的方法。常见饮食诱导NAFLD 的动物模型主要包括高脂高糖饮食诱导模型、高脂高胆固醇饮食诱导模型和胆碱缺乏饮食诱导模型,由于不同造模方式摄入的营养成分不同,使得肝出现脂肪性变形、炎症及纤维化等病理特征不同。此外,不同动物模型的疾病进程、疾病严重程度以及适用的研究亦各有不同。本文通过分析比较常见的不同饮食诱导NAFLD 动物模型在造模方式、造模时间、病理学特征、适用研究及相关优缺点,为NAFLD 研究者选择动物模型提供参考。

摘要:系统性硬化症(systemic sclerosis,SSc)是一种以血管病变、皮肤纤维化为特征,可引起多器官结构和功能损害的自身免疫性疾病,SSc 发病机制复杂,可能与遗传、环境因素、免疫机制异常等有关。自噬是一种在进化上保守的机体内自降解过程,可通过多种途径参与机体免疫及自身免疫性疾病发病。本文主要综述自噬通过调节免疫细胞、介导信号通路调控SSc 血管病变和纤维化的研究进展。

摘要:肝是最常见的肿瘤远处转移脏器,miRNAs 的表达对肿瘤肝转移的过程非常重要。本文整理分析了相关miRNAs 调节消化系统中恶性肿瘤发生肝转移起调节作用的研究进展。查阅相关文献介绍miRNAs 在结直肠癌、胃癌、胰腺癌、胆囊癌等几类消化系统肿瘤肝转移过程中发挥的调节作用,为肿瘤肝转移诊断、治疗及研究提供帮助。

摘要:器官移植是机体器官功能衰竭的主要治疗方法,而供体器官在离体运输过程中的功能保护是决定器官移植成功与否的关键,如何保护离体运输过程中的供体器官功能是当今器官移植研究领域的热点问题之一。在低氧环境下,组织细胞会激活一系列基因的转录活性,这些基因参与血管生成、铁代谢、葡萄糖代谢和细胞增殖/生存。在需氧生物体内,缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factors-1α,HIF-1α)参与多种基因表达的调控,以维持组织、细胞在缺氧条件下的内环境稳态,从而适应缺氧状态。多项研究表明,HIF-1α 信号通路在离体器官冷保存过程中,对其遭受的冷缺血损伤具有重要保护作用,是当前离体器官冷缺血损伤保护机制的研究热点,干预HIF-1α相关信号通路有望成为离体器官冷保存过程中维护器官功能的新策略。

摘要:随着中国经济的迅速发展和城市化进程的持续加速,大气污染问题日益凸显,对人类健康产生了极大的影响。最近几年来,国内外的研究工作大量涌现,研究结果显示,在妊娠期间接触大气污染物和不良妊娠结果之间存在一定的相关性,大气污染对孕妇和胎儿健康的影响随之受到更多的重视。本文主要就大气污染物对部分不良妊娠结局的影响及其可能的生物学机作一简要综述。

摘要:肾容易受到体内外各种物理、化学和生物因素的影响,致使肾功能损害,造成急慢性肾疾病。预防和治疗各种因素引起的肾功能损害是泌尿系统研究的重要内容。斑马鱼幼鱼通体透明、产卵量大、易于基因编辑,在肾的形态、生理、功能等方面以及对化合物的反应也与人类具有很高的相似性,是理想的动物模型。本文将对斑马鱼肾损伤造模方法及评价指标进行综述。